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对人参皂苷对照品进行定性和理化鉴别
日期：2019-01-10浏览：1303次
对人参皂苷对照品进行定性和理化鉴别
由于人参皂苷Rh2的抗癌机制与传统药物不同，它不具有细胞毒性，不直接杀伤癌细胞，也不会伤害正常细胞，而是通过对癌细胞的分化诱导来实现抑制癌细胞增殖、改变癌细胞功能，随着人参皂苷Rh2浓度的升高，黑色素瘤B16细胞存活率逐步下降，经人参皂苷Rh2处理的B16黑色素瘤细胞穿越小室的细胞数明显减少，并呈剂量效应关系。已有研究显示，黑色素瘤与基底膜的黏附作用受与层粘连蛋白(LN)受体a6、B4等的影响。而人参皂苷Rh2能够通过影响这些粘连蛋白，来减少肿瘤细胞侵袭转移的能力。
人参皂苷对照品含量测定鉴定
1.定性鉴别：
①取样品1～2mg，置白瓷板上，加4%硫酸溶液4滴，逐渐变为橙黄色至橙红色。
②取样品1g，加水10ml，搅拌溶解，分为2等份，取一份置试管中，强力振摇，产生持久性泡沫，一份加稀H2SO4，即生成大量沉淀，再加过量氨溶液沉淀又复溶解。
2.定量鉴别：
取样品6g，到万分之一，加蒸馏水50ml溶解后，移于100ml容量瓶中，用乙醇稀释到刻度，搅匀，静置12h，用吸液管取上清液25ml，置烧杯中，加氨试液3滴，置水浴上蒸发至稠膏状，加水30ml溶解，缓慢加入3%盐酸5ml，在冰水中静置30min左右，过滤，沉淀物用冰水洗涤4次，每次用冰水5ml，弃去洗液及滤液，收沉淀物在滤纸上放置2～3h后，干燥称重。
遇光颜色转深。有苦味。熔点177～178℃。于95～97℃下干燥则成两分子结晶水物。于110℃真空(1.33×103Pa)下干燥12h后成无水物。无水物易潮解，熔点190～192℃，在大气中可吸收2.5分子的水。于冷水中溶解度为0.012%，热水中溶解度为5%。微溶于乙醇。
人参皂苷对照品理化鉴别：
1.试管反应:本品乙醇浸液,滴加三氯化锑lv仿饱和溶液,显紫色（检查人参皂甙）．
2.薄层层析:
样品液取本品粉末1ｇ,加lv仿40ｍｌ,置水浴上回流1小时,弃去lv仿液,药渣挥干残存溶剂,加水0.5ｍｌ拌匀湿润后,加水饱和的正丁醇10ｍｌ,超声处理30分钟,吸取上清液,加氨试液3倍量,摇匀,放置分层,取上层液蒸干加甲醇溶解,使成1ｍｌ．对照品液取人参皂甙Rb1、Re、Rg1,加甲醇溶解,使成2mg/ｍｌ的混合溶液．展开硅胶G自制板,厚度0.5ｃｍ；点样1～2ｍｌ．以lv仿－乙酸乙酯－甲醇－水（15:40:22:10）10℃以下放置后的下层溶液为展开剂,上行展开12～14ｃｍ．显色喷硫酸乙醇溶液（110）,105℃加热至斑点显色清晰,置紫外光灯（365nm）下观察,样品与对照品在相同位置显相同色斑．
3.DNA分子遗传标记鉴定:用RAPD、DNA测序等方法鉴定人参、西洋参DNA测序:Fushimi等对人参属３种植物人参、西洋参和竹节参药材以及相关新鲜材料,采用18S-rRNA基因片断通用引物对18SF和18SR,通过PCR扩增,结果得到了约1.8kb片段的PCR产物．经过DNA测序发现3种药材间的18S-rRNA基因片断上第497、499、501和712号核苷酸序列不同,可用来鉴别人参及其相关药材．进一步采用matK基因片断通用引物对matKAF和matK8R,经过DNA测序发现西洋参与人参、竹节参间的matK基因片断上核苷酸序列差异可用来鉴别人参与西洋参．
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